Prueba molecular de secuenciación en el cáncer de mama

 

Secuenciación de sanger en el cáncer de mama

La gran mayoría de las alteraciones genéticas responsables del cáncer de mama y ovario corresponden a variantes puntuales en los genes BRCA1/2, consisten en cambios de una sola base o deleciones/inserciones de pocas bases que producen truncamiento de proteínas, interrupción del procesamiento del ARN mensajero o sustituciones de aminoácidos que tienen un impacto significativo en la función de la proteína. Estas variantes son detectadas mediante la secuenciación Sanger, que es el método Gold standard para el análisis genético de variantes puntuales, método por el cual se determina la secuencia de nucleótidos del ADN, mediante electroforesis capilar de productos fluorescentes

Bibliografía:

1.- Benítez J et al. Nuevo abordaje en el diagnóstico del cáncer de mama y ovario hereditario mediante secuenciación masiva [Internet]. 2023 [citado 21 de junio 2024]. Disponible en: https://roderic.uv.es/rest/api/core/bitstreams/de7c65ef-cb0e-4c57-bc74-55ba08a9aa13/content

Una técnica de PCR

 Técnica de PCR en la influenza (virus de la gripe)

Los virus de la influenza son virus de ARN, existen tres tipos (tipo A, B y C). El genoma viral segmentado está encerrado en una envoltura superficial que contiene lípidos y que tiene hemaglutinina (H) y neuraminidasa (N), dos antígenos de superficie principales. La confirmación de la influenza (virus de la gripe) se puede realizar mediante cultivo del virus, RT-PCR o anticuerpos neutralizantes específicos en la sangre a partir de hisopos nasofaríngeos/faríngeos o aspirados traqueales en pacientes intubados, preferiblemente dentro de los 4 a 5 días posteriores a la enfermedad. La prueba de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR) sigue siendo la principal base de diagnóstico (1).

Imagen. Researchgate.net [Internet] [citado 15 junio 2024]. Disponible en: https://www.researchgate.net/figure/Figura-1-Flujograma-que-resume-los-pasos-de-la-tecnica-RT-PCR-1-Recoleccion-de-las_fig1_357357615

Tema: Diagnostico del virus de la gripe (Influenza)

Objetivo: Presentar la técnica de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR) múltiple para la detección del virus de la gripe (influenza), lo que la convierte en un método indispensable en diversos campos de la biología molecular y la medicina

Tipo de muestra biológica: hisopado nasofaríngeo/orofaríngeo o aspirados

Tipo de ácido nucleico: ARN viral, su extracción se realizó usando el kit comercial QIAamp® Viral RNA mini kit (Qiagen) y se almacenó a -80 ºC hasta el procedimiento de RT-PCR múltiple

Gen o secuencia a amplificar: gen de la matriz del virus influenza A (1027 pb), gen de la nucleoproteína del virus influenza B (1565 pb) y el gen GAPDH de las células huésped (1200 a 1500 pb), gen de la hemaglutinina de los subtipos A (H1N1) pandémico (pdm09) con 13,600 pb y A (H3N2) con 13,588 pb

Tipo de PCR: RT-PCR múltiple en tiempo real.

Número de copias: El límite de detección viral fue del rango de 7 a 9 copias/µL por virus

Visualización: Para visualizar los resultados de una RT-PCR múltiple se utilizan: electroforesis en gel, microarrays y fluoróforos específicos (2).

Bibliografía

1.- Kumar V. Influencia en niños. Indian J Pediatr [Internet]. 2016 [citado 15 Jun 2024]; 84(2):139-143. Disponible en: https://link.springer.com/article/10.1007/s12098-016-2232-x

2.- Marcos P, Huaringa M et al. Detección de virus influenza A, B y subtipos A (H1N1) pdm09, A (H3N2) por múltiple RT-PCR en muestras clínicas. Rev. Perú. Med. [Internet]. 2017 [citado 17 de junio 2024]; vol.34 no.2. Disponible en: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1726-46342017000200005

Alteraciones en la Epigenética

 Alteraciones en la epigenética de la hipertensión

Un estudio realizado en Holanda, indicó que los niños de madres con escasa ingesta de proteínas, en relación con la ingesta de carbohidratos, durante el tercer trimestre del embarazo tuvieron una presión arterial más alta en la edad adulta. En Japón un estudio realizado en ratas mostró que la descendencia de madres que tuvieron una alimentación baja en proteínas desarrollaron hipertensión con metilación del ADN disminuida y posterior aumento de la expresión del gen del receptor de angiotensina II tipo 1b (Agtr1b) en la glándula suprarrenal. Estos cambios, implicados en el desarrollo de hipertensión, se ven muy temprano en la vida y duran hasta al menos 12 semanas de edad, lo que sugiere un tipo sostenido de desmetilación de ADN en una dieta baja en proteínas

Bibliografía

Polo V, Martínez F et al. Factores de Riesgo asociados a la Hipertensión Arterial en adultos. Rev. Navarra Médica [Internet]. 2018 (citado 07 junio 2024), 4 (1): 32-39. Disponible en:https://journals.uninavarra.edu.co/index.php/navarramedica/article/view/a4-v4-n1-2018/17